1 适用范围
适用于实验动物室小动物活体成像系统的使用与维护。
2 生效日期
本SOP文件自2026年2月2日生效。
3 目的
规范Perkinelmer 活体光学成像系统的操作规程。
4 操作方法
4.1. 在仪器使用记录本登记及扫码在易控小程序登记。
4.2. 开机步骤:打开仪器主机电源;打开相机电源;拍摄荧光还请打开荧光光源开关。
4.3. 启动计算机:点击Living Imaging软件启动程序,并点击Initialize初始化IVIS系统;初始化时,IVIS Acquisition Control Panel中的温度状态灯为红色,当温度状态灯绿色时可进行成像。
4.4. 生物发光和荧光单张图像获取操作步骤:
将预麻醉的小鼠放入成像箱,小鼠头部置于麻醉玻璃面罩内,轻轻关门;
IVIS Acquisition Control Panel中选择成像模式:Luminescent(生物发光)或Fluorescent(荧光);
选择曝光参数,默认值为Auto(注:也可手动调节成像参数,包括Exposure Time曝光时间,Binning,f/stop光圈);
确保Photograph和Overlay选项被勾选;
选择成像视野大小:ABCD。A适用于小鼠局部成像,D可同时成像3只小鼠;
选择小鼠成像高度(Subject height)为1.50 cm;
对于生物发光成像,Excitation Filter默认为Block,Emission Filter默认为Open,对于荧光成像,需依据目标荧光染料或探针选择合适的激发(Excitation Filter)和发射(Emission Filter)滤光片;
点击Acquire按钮获取成像图片,在自动弹出的Image Labels中对图片进行命名和注释;
获取图片后,点击Tool Palette中的Image Adjust,将Individual勾选框去掉,使得Color Scale可以显示出来,点击Tool Palette中的ROI Tools,选取Circle,Square,Free Draw 或Grid进行ROI圈选;
点击Measure ROIs,获取ROI区域的定量数值,对于生物发光成像,定量单位为Radiance(photons),对于荧光成像,定量单位为Radiant Efficiency。
4.5. 生物发光和荧光序列图像(Sequence)获取操作步骤:
将预麻醉的小鼠放入成像箱,小鼠头部置于麻醉玻璃面罩内,轻轻关门;
IVIS Acquisition Control Panel中点击Imaging Wizard,点击选择Luminescence或Fluorescence;
对于生物发光成像,选择Luminescence-Open Filter后点击Next,在弹出的窗口中选择成像物体(Imaging Subject)和拍照参数(一般默认值为Auto),点击Next,然后在IVIS Acquisition Control Panel中点击Acquire Sequence;
对于荧光成像,选择Fluorescence后,点击Filter Pair,选择合适的荧光染料或染料对应的激发/发射滤光片对,点击Next,在弹出的窗口中选择成像物体(Imaging Subject)和拍照参数(一般默认值为Auto),点击Next,然后在IVIS Acquisition Control Panel中点击Acquire Sequence;
如要进行连续动态拍摄,勾选Time Series Study,输入所需拍照数量(Total number of segments)和拍照间隔时间(Delay between segments)。
4.6. 关机操作:
短时间停机(停用间隔在数小时之内): 退出关闭 Living imag软件即可。
结束使用: 关闭软件,关闭电脑,关闭仪器电源。
5 日常使用注意事项
5.1. 仪器工作时必须保证室内温度≤26 度(超过 26 度会加大像机的损耗);室内相对湿度小于 60%,室内没有明显扬尘。
5.2. 仪器使用完毕后如果停用时间大于 2个小时,请将软件退出关闭。(软件退出关闭后,像机即停止工作,处于待机状态。有助于减少相机的损耗。
5.3. 为了防止电脑中病毒,不要在电脑上使用 U 盘。 电脑上有刻录机,可以刻录光盘转移数据。
5.4. 实验结束后,请将样本取出,并清理载物台,保持载物台干净。
5.5. 仪器的清洁不能使用有机试剂(包括乙醇)。
5.6. 每三个月检查清理一次载物台下面的杂物。
5.7. 如果仪器需要进行预热,请提前预热,否则仪器无法进入程序。
5.8. 科研人员不得建立新的程序,不得改动或者删除程序列表中的任何程序。
5.9. 如果发现仪器出现任何异常情况,请按紧急按钮停止运行,同时联系管理人员进行处理。