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CO2培养箱使用与维护SOP_XBYQ.10.012.260304
2025-12-26 15:05 李敏惠 

1 适用范围

Ø 所有科研人员及管理人员

2 生效日期

Ø SOP文件自202634日生效,原SOP文件《20.010.02.Thermo Forma 3110 series CO2培养箱使用与维护SOP》停止执行。

3 目的

Ø 规范细胞室CO2培养箱操作规程

4 职责

Ø 科研人员:认真执行本SOP的内容,并作好相关记录。

Ø 管理人员:培训、指导科研人员正确执行本SOP,同时需按本SOP对设备进行定期维护保养并作好相应记录。

5 内容

5.1 SOP适用于细胞平台CO2培养箱的使用与维护。

5.2 主要性能参数

Ø 控温范围:1055

Ø 气体范围:CO2 0-20%

5.3 基本操作

Ø 开机:打开电源开关(左侧上端),仪器自检并初始化;

Ø 加水(水套式):开机后如显示加水(ADD WATER),从注水口(右上角)加入PH745升左右蒸馏水或纯净水,(最好是高纯水)直到(ADD WATER)消失一声鸣叫为止;水箱出厂是加有氢氧化钠8ml和锈抑制剂。

Ø 放入湿度盘:将盛无菌蒸馏水的湿度盘中,加入CUSO4至饱和状态,放入培养箱;

Ø 接入CO2:缓慢旋转气体瓶上的总压阀门(顺时针旋紧为关闭气体,逆时针旋松为打开气体),再调整分压阀门(逆时针旋出为关,顺时针旋进为开),根据气表刻度标识,要求分压<0.07MPA

Ø 温度校正:按MODE键进入设置菜单(SET),温度设为37℃,CO2值设为0,MODE键返回RUN状态,开始加热;当温度上升到37℃并稳定在37℃达12小时后,用一支体温表放在箱体内测量出箱体内温度,再进入校正菜单(CAL)把此读数输入温度校正项;待温度稳定在37℃后,再进入校正菜单(CAL)把CO2项的值改为0

Ø CO2浓度校正:进入SET,把CO2值设为5%,此时开始进气,正常工作;待箱内温度、湿度、CO2浓度稳定12小时后稳定后, 进入校正菜单(CAL),通过左上角CO2采气口测试CO2含量,将该值输入校正CO2浓度(5%稳定值一般由公司在系统维护的点校正处设定)

Ø 在配置菜单(config)中,HAPE过滤器更换可按自己要求设置,到时会报警;

Ø 所有参数设置后都必须按ENTER键确认。

5.4 注意事项

Ø 若有异常情况应立即断开电源使仪器终止运转。

Ø 仪器表面不可与汽油、香蕉水等挥发性化学品接触。

Ø 开启培养箱前请以酒精喷洒双手消毒,非必要时请勿反复及长时间开启培养箱。

Ø 注意培养箱之温度(37°C)及气体浓度(5% CO2)是否正常(Thermo3110三气培养箱需检查氧气读数是否正常),水盘内是否仍有水,盘内无菌水更换由本室管理员进行。如遇水盘内无水,请及时告知管理人员,以免影响培养箱的饱和湿度。

Ø 容器置入前请先检查是否预留空气流通之空间,取出后请记得锁紧瓶口。

Ø 所有放入培养箱的培养瓶均需标记。

Ø 请不要随意调整CO2/N2进气压力表和减压表,减压表读数不要超过0.07MPa。减压表旋出(逆时针)为关,旋进(顺时针)为开。

Ø 若长时间不使用培养箱时,必须把CO2N2设置为0。否则电磁阀长期处于工作状态,发热导致其损坏。

Ø CO2的浓度若没有标准的CO2测试仪,则不要轻易在CAL模式中校正CO2的浓度。

Ø Co2浓度与37度湿度密切相关,所以其校正应在37度饱和湿度下进行。

Ø 因进气阀门在停电是自动关闭,来电后正常开启,所以停电对系统压力无影响。

Ø 取放物品时尽量减少开门时间;

Ø config(配置)中的设置不能随意更改。如需更改,请与实验室管理员联系。

Ø 气体瓶上的总压阀门旋紧时为打开气体,旋松时为关闭气体,开气时要求缓慢的旋转。分压阀门操作方向相反,逆时针旋出为关,顺时针旋进为开,分压要求<0.07MPA;开气前,要求减压阀门是旋松的关闭状态,调整时做到非常缓慢顺时针旋进。

5.5 维护保养

Ø 不要随意频繁打开箱门。

Ø 保持箱内外洁净,每半年对仪器作一次清洁。

Ø 每天检查CO2水箱。

Ø 每年检查门锁、铰链、门垫圈密封情况。

Ø 每周检查湿度盘里水的体积,约1/2体积。

Ø 每年校正CO2、湿度、温度。

Ø 日常清洗湿度盘、架子、管道、换或清洁增压机轮子和卷轴。

Ø 2年补充水箱中锈抑制剂。

Ø 根据使用情况,更换高效粒子空气过滤器HEPA和气体过滤器,定期做箱体菌落沉降实验。

Ø 消毒培养箱内部:清洁、漂()、晒干,使用70%的酒精消毒必须完全干燥后才能开电源。

Ø 仪器承压<0.07Mpa,压力大,充坏过滤膜,系统不稳定。

Ø 一般大气压力19.0,设定21%。

Ø Hepe过滤器可以在40-50度烘干后紫外灭菌延长使用寿命。

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