1            适用范围

Ø  本SOP适用于chemiDoc 化学发光凝胶成像检测仪的使用和维。

2            职责

Ø  操作人员：认真执行本SOP的内容，并作好相关记录。

Ø  设备管理员：培训、指导操作人员正确执行本SOP。

3            主要性能参数

3.1             像素大小：1392×1040；像素密度：16位（65536色）；像素尺寸（H×V）：6.7×6.7ｕm
分辨率：1.44百万像素；动态范围：大于4个数量级；镜头冷却系统/冷却温度：Peltier/-50℃；
马达控制可变焦镜头：C-mount，f/1.2，12-75mm；照明模式 ：透射紫外，白光及侧白光。

4            主要应用范围

5            核酸检测、Western杂交、双向凝胶电泳、光密度计算、克隆技术、斑点印迹等。

6            控制面板说明 见图1

图1. 光源控制面板说明

Ø   按键功能说明

Power light	电源打开，开始工作
Imaging LED	1：指示灯闪烁，表示正在获取图像；2：指示灯闪烁可能在电脑关闭的时候
TransUV button	控制紫外透射器打开与否，如果Hold button没有打开，其功能15min自动关闭； 且当前门或者抽屉打开的时候其功能会自动关闭。请当心紫外线对人体损伤。
The Prep UV switch	先开trans uv才能开PREP UV，其功能为减弱透射紫外线的强度，可减少DNA长时间曝光于紫外线下的损伤。例如在进行的切胶操作的时候。
Epi White button	控制周围白光（两侧）打开与否，如果Hold button没有打开，其功能15min自动关闭；当透射紫外打开的时候，其功能自动关闭。
Trans White Light	控制白光透射打开与否，如果Hold button没有打开，其功能15min自动关闭；
Hold key	按下该按钮，实现紫外和白光自动关闭的功能丧失。请当心紫外线对人体损伤。

7            曝光控制面板

Ø  机身面板

图2. 曝光控制面板

 

Ø  按键功能说明

8            操作步骤：

8.1        打开电源

Ø  打开机身背部左下方机身电源开关，后打开CCD电源开关

   

图3. 机身电源开关（左）和CCD电源开关（右）

8.2        放入凝胶、调节位置

Ø  打开抽屉放入琼脂糖凝胶（左）或SDS-PAGE凝胶或PDF（右）

    

图4. 两种凝胶载物台用于琼脂糖凝胶（左）或SDS-PAGE凝胶以及PDF（右）

 

Ø  打开Quantity One软件，点击File选择ChemiDocXRS，预热机器半小时，按下Select键，选择EPI White，周围白光功能打开，按下Live Focus按钮，调节凝胶位置居于视野中央。

   

图5. 打开软件，调用周围白光功能调节凝胶位置居于视野中央

8.3        曝光

Ø  选择滤镜（机身右侧顶部）

图6. 根据实验需要No Filter或Filter1

Ø  选择光源：

Ø  按下Iris、Zoom、Focus按钮确定图像大小和最佳曝光参数

图7. 按下Iris、Zoom、Focus按钮确定图像大小和最佳曝光参数

Ø  曝光按钮选项

 

图8.曝光功能按钮选项，左：自动曝光（Auto Expose），手动曝光（Manual Expose）

以及按设定实时获取图像（Live Acquire）；右：实时获取图像参数的设定

9            图像采集与保存

9.1             图象采集模式中FREEZE：用于抓取当前图像。

9.2             图象采集模式中Save：用于储存图像。

9.3             图像格式转换：打开获取的图像，选择File\Expose to JPEG. 将转换成JPEG格式的图像用U盘拷贝即可在其他电脑上打开并编辑。

10          使用完毕后请关闭电源和清洁凝胶载物台

Ø  为避免凝胶载物台被凝胶缓冲液腐蚀，使用完毕后，持泡沫浸没去离子水拧干后轻轻擦拭其表面。

Ø  为防止水蒸汽腐蚀CCD成像头，请使用完毕后敞开载物台，保持内部空间干燥。

11          注意事项

Ø  不准使用化学发光凝胶成像仪做切胶回收，

Ø  实验者若发现图像模糊或有杂点，请勿擅自拆下镜头和滤光片进行擦拭，请通知设备管理员。

Ø  使用完毕后请关闭电源和清洁凝胶载物台