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移液器使用与注意事项_ZXYQ.50.010.140428
2014-05-03 16:45 刘进 

1          适用范围

Ø SOP适用于科研实验中心移液器的使用

2          移液器结构示意图

         

3          移液器操作流程

3.1  根据移取液体体积,选择合适量程的移液器。

Ø        单次移取液体体积在移液器量程范围内,选择最接近最大量程的移液器。(就近原则:在移取1μL液体时,优先选择0.1-2μl移液器,而不是选择0.5-10μl移液器,这样可以保证移液体积更准确,同时减少了旋转体积调节按钮的圈数,节省时间。)

Ø        单次移液比多次移液误差小。

3.2  设定移液量

Ø        转动移液器顶部的按钮进行移液量的设定。

Ø        逆时针转动可增加移液量,顺时针转动可减少移液量。

Ø        刚开始旋转操作按钮时,缓慢旋转。观察读数是变小还是变大,从而改变旋转方向。

Ø        设定的移液量不能超出该移液器标定的移液范围。过度用力试图把按钮转至额定范围之外将造成机械件卡死,最终导致移液器损坏。

3.3  安装吸头

Ø        嘴锥对准吸头,轻轻用力下压,同时还可旋转或左右摆动移液器(不同品牌的移液器上吸头的方式可能不同,因此对安装吸头的方式未做统一要求。)

Ø        切记用力不能过猛,更不能采取剁吸头的方法来进行安装,因为那样做会对您手中的移液器造成损害。

Ø        下按力度应保证吸头与移液器嘴贴合紧密,无漏气。吸液后,吸头不漏液。

3.4  吸液

Ø 先将移液器排放按钮按至第一停点,再将吸头浸入液面。

Ø 浸入液面的深度不能过大。(浸入过深的话,液压会对吸液的精确度产生一定的影响。还有一点,吸头外壁吸附过多液体,影响吸液准确性。)

Ø 平稳缓慢松开按钮,切记不能过快。(过快会导致液体上冲,流入移液器内腐蚀弹簧和活塞。)

Ø 缓慢松开按钮后,待吸头内液面不再上升后,才能将吸头移出液面。(过早移出液面会吸入气体,导致吸液体积偏小。)

Ø 吸头移出液面后,可在空中悬停数秒,观察吸头是否漏液。(如果漏液,可能因为吸头未安装好,也有可能是嘴锥上刮痕或者活塞密封圈损坏。需要注意:吸取易挥发液体时,漏液属于正常现象。例如:吸取乙醇,吸头会漏液。)

Ø 当移液器吸头里有液体时,切勿将移液器平放或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞和弹簧。

3.5  放液

Ø 放液时,吸头可紧贴容器壁或浸入液面,也可悬空。(根据实际需要选择:移取小体积时,不能悬空加入,吸头会挂液。如果重复移取同一种液体到另一种液体内,不想更换吸头时,可以悬空放液,但应注意防止另一种液体溅在吸头上。如果吸头被污染,应果断更换吸头。)

Ø 先将排放按钮按至第一停点,略作停顿以后,再按至第二停点,这样做可以确保吸头内无残留液体。

Ø 放液结束,吸头离开液面,才能松开排放按钮。

3.6  卸去吸头

Ø 操作时移液器吸头对准废物缸,然后用大拇指按住吸头推杆顶向下压,则可安全退除吸头。

Ø 有时,因为吸头和移液器不匹配,下按吸头推杆,无法退除吸头,可用手取下。切勿过度用力下按吸头推杆。

4          移液技术(考核只要求掌握前进移液法,其余移液方法若实验需要可自学。)

4.1  前进法

    

                        

1)       将按钮压至第一停点位置。

2)       将吸头浸入液面,不要过深缓慢松开按钮,待吸头内液面不上升后,将吸头移出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。

3)       轻轻压下操作按钮至第一停点位置,约1s后继续将按钮向下压至第二停点,此作用是排尽吸头内的溶液。

4)       松开按钮使之返回起点位置。(Tip头离开液面前,不得松开按钮。需要时,可更换吸头继续移液操作。)

4.2          倒退法

Ø 倒退法适用于高黏度液体或易起泡沫液体的移液,此方法也推荐用于极微量液体的转移。(移液体积应小于移液器量程的一半)

 

1)       将按钮压至第二停点位置。

2)       将移液器吸头浸入液面,然后缓慢松开按钮吸液。待吸头吸入溶液后,将吸头移出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。

3)       轻轻按下按钮到第一停点位置,放出预设定的液体。将操作按钮保持在第一停点位置,使少量不包括在移液量内的液体仍留在吸头内,此时不得松开按钮。

4)       排液后,在废弃Tip头内剩余液体之前,不得松开按钮。

5)       排掉剩余液体后废弃Tip头。

4.3  重复移液法

Ø 重复移液法提供了快速、简单地重复转移相同容量的液体

1)       将操作按钮下压至第二停点位置。

2)       将移液器吸头浸入液面,然后缓慢松开操作按钮。该操作可以将液体吸入吸头。待操作按钮回至起始位置后,将吸头移出液面并斜贴在试剂瓶壁上淌走多余的液体。

3)       轻轻按下按钮到第一停点位置,放出预设定的液体。将操作按钮保持在第一停点位置,使少量不包括在移液量内的液体仍留在吸头内。重新插入待转移溶液之前,不得松开按钮。

4)       重复第三步和第四步,可重复转移相同容量的液体。

5          注意事项

5.1   使用前应确保你使用的这套移液器总数数目正确。如发现缺失,应及时告诉管理员。

5.2   使用前应检查移液器是否完好,无破损、零部件缺失等。

5.3 使用前需检查嘴锥是否被污染,若有污染,则需擦拭干净。(下按按钮,观察嘴锥内是否有液体。)

5.4   吸放液体时,下按或松开操作按钮应缓慢,尤其是做高粘度液体时更应如此,绝不允许让操作按钮极速弹回

5.5   当移液器吸头里有液体时,切勿将移液器平放或倒置,以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

5.6   移液器在混匀液体时,不得使用最大量程,避免液体反冲至移液器的吸头嘴锥,建议使用最大量程的一半来操作。

5.7   当使用体积超过1ml(含)Tip头时,在移液前可先将溶液吸入新装的Tip头,然后排空、吸入反复23次后方可进行实际操作。(根据吸液体积的精确要求选择是否需要润洗吸头)

5.8   吸液完毕后,应将移液器调回最大量程,避免移液器弹簧长期压缩而损坏

5.9   将移液器放回移液器架子上,检查同一套移液器操作按钮的高度是否相同。若不同,则有移液器未调回最大量程。

5.10             不将一个平台的移液器,拿到其他平台使用。

5.11             不将非同一套移液器混用、混放,尤其注意不要混放,这会对我们移液器日常维护工作造成极大不便。(中心购买的新的移液器,还未到货,目前暂时会混用多种品牌的移液器。)

5.12       擦拭移液器,应使用75%的酒精溶液,不要使用其他溶剂清洁移液器。

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